Cromatografia pe coloană este o metodă utilizată pe scară largă pentru separarea și purificarea amestecurilor de compuși chimici. Instrumentarea cromatografiei pe coloană implică mai multe componente cheie care asigură o separare eficientă. Iată o prezentare generală a instrumentarului:
1. Coloana
Material:Fabricat de obicei din sticlă, oțel inoxidabil sau plastic.
Dimensiune:Variază în funcție de scara cromatografiei (analitică, preparativă sau industrială).
Ambalat cu:Faza staționară (de exemplu, silicagel, alumină sau rășină).
Frit sau filtru:Împiedică ieșirea fazei staționare din coloană cu faza mobilă.
2. Faza staționară
Compoziţie:Material solid cu proprietăți de adsorbție specifice.
Tipuri:Silicagel, alumină sau rășini funcționalizate (de exemplu, materiale schimbătoare de ioni sau de afinitate).
3. Faza mobilă
Solvent sau amestec de solvenți:Transportă proba prin faza staționară.
Tipuri:Nepolar (de exemplu, hexan), polar (de exemplu, metanol, apă) sau un gradient de polaritate.
4. Injector de probă
Folosit pentru a introduce amestecul de probă pe coloană.
Poate fi o injecție manuală sau un sistem automat pentru control precis.
5. Pompă (Opțional)
Asigură un flux consistent al fazei mobile.
Folosit în cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) sau atunci când este necesar un control precis al debitului.
6. Detector (Opțional)
Identifică și cuantifică componentele separate în timp real pe măsură ce eluează din coloană.
Exemplele includ:
Spectrofotometru UV-Vis
Detector de fluorescență
Spectrometru de masă (MS)
Detector de indice de refracție (RI).
7. Colector de fracții
Colectează fracțiile separate ale compușilor pe măsură ce eluează din coloană.
Poate include colectarea automată pe baza orei sau a semnalului detectorului.
8. Sistem de achiziție de date (opțional)
Înregistrează și analizează datele de la detector.
Generează cromatograme care afișează procesul de separare.
9. Accesorii
Regulatoare de presiune:Preveniți suprapresurizarea.
Termostate sau încălzitoare:Controlați temperatura coloanei, dacă este necesar.
Supape:Gestionați fluxul fazei mobile și al probei.
Pentru configurații mai simple (de exemplu, cromatografia pe coloană pe bază de gravitație), pompele, detectoarele și sistemele automate pot să nu fie necesare. În schimb, sistemele gravitaționale sau de joasă presiune conduc faza mobilă prin faza staționară.